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震撼新品首发—Meilunbio快速FITC 抗体(蛋白)标记试剂盒!!!
2019-05-30  来源:美仑生物

 

Meilunbio快速FITC抗体(蛋白)标记试剂

MA0362     3 Labelings [¥2500.00]

FITC相关参数

激发/发射(nm):

494⁄518

染料:

Fluorescein (FITC)

标记规格

0.5-1 mg

标记目标:

蛋白质(抗体)

产品规格:

3 T

美仑快速FITC 抗体(蛋白)标记试剂盒 (Quick FITC Antibody(protein) LabelingKit)包含蛋白质标记染料和去除多余染料所需的全部组分。异硫氰酸荧光素(FITC)可以与蛋白质上的氨基,巯基,咪唑基,酪氨酰基和羰基发生交联反应。然而,只有伯胺和仲胺的衍生物才能产生稳定的标记产物。反应在pH 8-9下效率最高,并且必须在无胺缓冲液如硼酸盐或碳酸盐/碳酸氢盐中进行。通常,蛋白质与15至20倍摩尔数的FITC反应,可导致几个FITC分子与一个蛋白质分子结合。装填有纯化树脂的离心柱简化了柱平衡、收集和监测重力流分的步骤。该系统能够有效去除多余的FITC,从而准确测定染料与蛋白的比例(F/P)和蛋白浓度。

本试剂盒可用于标记和纯化3次 1 mg (2mg/mL)或者6次0.5mg (2mg/mL)的IgG或其他蛋白质。

试剂盒特点:

•操作简单,可在约一小时完成蛋白标记和纯化

•优化的F/P值

•无需称量微量粉末; 试剂盒包含一次性试剂瓶

•高效的纯化试剂盒包括纯化树脂和离心柱,确保快速有效地去除未反应的染料并拥有优异的蛋白质回收率

 

应用:标记抗体或者含有伯氨的蛋白质、多肽。

以事实为依据,与进口对比毫不逊色

图1. 美仑与进口品牌FITC 标记抗体流程及结果对比。美仑标记的FITC-IgG的F/P=2.4,好于进口品牌(0.189),并且在规定范围内,而且蛋白收率与进口品牌相当。

图2.本组数据分别采用商业化荧光二抗、进口品牌和美仑荧光标记试剂盒制作的FITC-IgG(羊抗鼠),用于免疫荧光流式检测Hela细胞GAPDH。由图可知,美仑与进口品牌试剂盒相比,FITC-IgG二抗背景荧光几乎相同,都在正常范围以内,但美仑实验组的检测效果更好,而且所用抗体量也最少。相同实验处理条件下,美仑的检出阳性率可达93.64%,与商业化荧光二抗检测出的阳性率相近(96.53%),说明美仑荧光标记试剂盒纯化得到的荧光二抗可以媲美商业化抗体,可以用于标记实验。

图3. A549-GAPDH细胞爬片免疫荧光镜检。采用美仑试剂盒标记的进行标记的FITC-IgG(goat anti-rabbit)荧光二抗,荧光显微镜40倍物镜拍摄,绿色荧光表示荧光标记的GAPDH,蓝色荧光代表细胞核。

图4. FITC标记BSA独立重复实验。FITC-BSA测得的参数进行对比,可以看出重复性非常好,F/P值以及蛋白浓度近乎一致

 

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